ઉત્પાદનો

Beta-D-2'-deoxy-2'-fluoro-2'-C-methylcytidine (PSI-6130) એ Huh-7 પ્રતિકૃતિ કોષોમાં હેપેટાઇટિસ C વાયરસ (HCV) RNA સંશ્લેષણનું એક શક્તિશાળી વિશિષ્ટ અવરોધક છે.HCV NS5B RNA પોલિમરેઝને રોકવા માટે, PSI-6130 5'-ટ્રાઇફોસ્ફેટ સ્વરૂપમાં ફોસ્ફોરીલેટેડ હોવું આવશ્યક છે.PSI-6130 ના ફોસ્ફોરાયલેશન અને HCV NS5B ના અવરોધની તપાસ કરવામાં આવી હતી.રિકોમ્બિનન્ટ હ્યુમન 2'-ડીઓક્સીસાઇટીડિન કિનેઝ (ડીસીકે) અને યુરિડિન-સાયટીડિન કિનેઝ 1 (યુસીકે-1) દ્વારા PSI-6130 નું ફોસ્ફોરાયલેશન એક જોડી સ્પેક્ટ્રોફોટોમેટ્રિક પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ કરીને માપવામાં આવ્યું હતું.PSI-6130 એ શુદ્ધ dCK માટે સબસ્ટ્રેટ તરીકે દર્શાવવામાં આવ્યું હતું, 81 માઇક્રોએમના કિમી અને 0.007 s-1ના kcat સાથે, પરંતુ તે UCK-1 માટે સબસ્ટ્રેટ નહોતું.PSI-6130 મોનોફોસ્ફેટ (PSI-6130-MP) અનુક્રમે રિકોમ્બિનન્ટ હ્યુમન UMP-CMP કિનેઝ અને ન્યુક્લિયોસાઇડ ડિફોસ્ફેટ કિનેઝ દ્વારા ડિફોસ્ફેટ અને ત્યારબાદ ટ્રાઇફોસ્ફેટમાં અસરકારક રીતે ફોસ્ફોરિલેટેડ કરવામાં આવ્યું હતું.વાઇલ્ડ-ટાઇપ અને મ્યુટેટેડ (S282T) HCV NS5B RNA પોલિમરેસિસના અવરોધનો અભ્યાસ કરવામાં આવ્યો હતો.જંગલી પ્રકારના એન્ઝાઇમ સાથે PSI-61 30 ટ્રાઇફોસ્ફેટ (PSI-6130-TP) માટે સ્ટેડી-સ્ટેટ ઇન્હિબિશન કોન્સ્ટન્ટ (Ki) 4.3 માઇક્રોએમ હતું.સમાન પરિણામો 2'-C-મેથિલેડેનોસિન ટ્રાઇફોસ્ફેટ (Ki=1.5 માઇક્રોએમ) અને 2'-C-મેથાઇલસિટીડાઇન ટ્રાઇફોસ્ફેટ (Ki=1.6 માઇક્રોએમ) સાથે પ્રાપ્ત થયા હતા.S282T મ્યુટેશન સાથે NS5B, જે 2'-C-મેથિલેડેનોસિન સામે પ્રતિકાર પ્રદાન કરવા માટે જાણીતું છે, તેને PSI-6130-TP દ્વારા જંગલી પ્રકાર તરીકે અસરકારક રીતે અટકાવવામાં આવ્યું હતું.PSI-6130-MP ના RNA માં શુદ્ધિકરણ NS5B RNA પોલિમરેઝ દ્વારા ઉત્પ્રેરિત થવાથી સાંકળ સમાપ્ત થઈ.