ઉત્પાદનો

ટ્રિસ એસીટેટ સોલ્ટનો વારંવાર TAE (Tris-acetate-EDTA) બફરની તૈયારીમાં ઉપયોગ થાય છે, જેનો ઉપયોગ ચાલતા બફર તરીકે અને એગેરોઝ જેલમાં થાય છે.ટ્રિસ એસીટેટ-ઇડીટીએ બફરનો ઉપયોગ ડીએનએ એગેરોઝ જેલ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ માટે થાય છે પરંતુ તેનો ઉપયોગ બિન-ડીનેચરિંગ આરએનએ એગેરોઝ જેલ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ માટે પણ થાય છે.ડબલ-સ્ટ્રેન્ડેડ ડીએનએ અન્ય બફરની તુલનામાં TAE માં ઝડપથી દોડે છે અને વિસ્તૃત ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ દરમિયાન થાકી શકે છે.વિસ્તૃત ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ દરમિયાન બફર પરિભ્રમણ અથવા બફર રિપ્લેસમેન્ટ નીચલા બફરિંગ ક્ષમતાને દૂર કરી શકે છે.ઉકેલમાં ડીએનએની ગતિશીલતાનો અભ્યાસ કરવા માટે વિવિધ સાંદ્રતામાં ઉપયોગ કરી શકાય છે.TBE બફરમાં બોરેટ (Tris-Borate-EDTA Buffer, 10X Powder Pack, sc-296651) ઘણા ઉત્સેચકો માટે મજબૂત અવરોધક હોવાથી, ડીએનએ નમૂના માટે એન્ઝાઈમેટિક એપ્લિકેશન્સ જોતી વખતે TAE બફરની ભલામણ કરવામાં આવે છે.ટ્રિસ એસીટેટ મીઠું એ ફાયરફ્લાય લ્યુસિફેરેસ સાથે એટીપી એસેસમાં ઉચ્ચ સંવેદનશીલતા સાથેનું બફર પણ છે.

ઉપયોગો: TAE રનિંગ બફર એ ડીએનએ એગેરોઝ જેલ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ માટે સૌથી વધુ ઉપયોગમાં લેવાતું બફર છે, અને તેનો ઉપયોગ મૂળ આરએનએ એગેરોઝ જેલ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ માટે પણ થાય છે.ડબલ-સ્ટ્રેન્ડેડ ડીએનએ અન્ય બફર કરતાં TAE માં વધુ ઝડપથી આગળ વધે છે, પરંતુ લાંબા સમય સુધી ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ દરમિયાન બફર આયનોના અવક્ષયને કારણે તરવામાં પણ નિષ્ફળ જાય છે.લાંબા સમય સુધી ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ દરમિયાન બફર સાયકલિંગ અથવા બફર એક્સચેન્જ નીચી બફર ક્ષમતાને વળતર આપી શકે છે.2 40 mM ટ્રિસ એસીટેટ અને 1 mM EDTA, pH 8.3 ધરાવતું 1 mMTAE બફર મેળવવા માટે કેન્દ્રિત TAE બફરને પાતળું કરો.1 mMTAE બફરનો ઉપયોગ એગેરોઝ જેલમાં અને ચાલતા બફર તરીકે બંનેમાં થઈ શકે છે.મહત્તમ રિઝોલ્યુશન માટે, એ આગ્રહણીય છે કે લાગુ વોલ્ટેજ 5V/cm (એકમ ઇલેક્ટ્રોડ વચ્ચેનું અંતર) કરતા ઓછું હોય.

એપ્લિકેશન: કેમિકલબુક જેલમાં ડીએનએ એગેરોઝ જેલ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ માટે TAE રનિંગ બફર સૌથી વધુ ઉપયોગમાં લેવાતું બફર છે, અને તેનો ઉપયોગ બિન-ડીનેચરિંગ આરએનએ એગેરોઝ જેલ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ માટે પણ થાય છે.ડબલ-સ્ટ્રેન્ડેડ ડીએનએ અન્ય બફર કરતાં TAE માં વધુ ઝડપથી આગળ વધે છે, પરંતુ લાંબા સમય સુધી ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ દરમિયાન બફર આયનોના અવક્ષયને કારણે તરવામાં પણ નિષ્ફળ જાય છે.લાંબા સમય સુધી ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ દરમિયાન બફર સાયકલિંગ અથવા બફર એક્સચેન્જ નીચી બફર ક્ષમતાને વળતર આપી શકે છે.કેન્દ્રિત TAE બફરને 1 mMTAE બફર મેળવવા માટે પાતળું કરવામાં આવ્યું હતું જેમાં 40 mM ટ્રિસ એસિટેટ અને 1 mM EDTA, pH 8.3 હતું.1 mMTAE બફરનો ઉપયોગ એગેરોઝ જેલમાં અને ચાલતા બફર તરીકે બંનેમાં થઈ શકે છે.મહત્તમ રિઝોલ્યુશન માટે, એ આગ્રહણીય છે કે લાગુ વોલ્ટેજ 5V/cm (એકમ ઇલેક્ટ્રોડ વચ્ચેનું અંતર) કરતા ઓછું હોય.

ઉપયોગો: ફાયરફ્લાય લ્યુસિફેરેસ સાથે એટીપીની તપાસમાં, આ ઉત્પાદન સૌથી સંવેદનશીલ બફર છે;ગ્લુટામેટ બંધનકર્તા શોધ.

બિન-રિસેપ્ટર સામગ્રીઓ માટે [3H]l-ગ્લુટામિક એસિડનું વિસ્થાપન કરી શકાય તેવું બંધન.

[3H]એલ-ગ્લુટામિક એસિડ માઇક્રોફ્યુજ ટ્યુબ અને કાચને બંધનકર્તા છે તેની તપાસ ચાર બફરમાં કરવામાં આવી હતી.આ સામગ્રીઓ માટે પૃષ્ઠભૂમિ બંધન નગણ્ય હતું, પરંતુ ટ્રિસ-એચસીએલ અને ટ્રિસ-સાઇટ્રેટ બફરમાં સેન્ટ્રીફ્યુગેશન અથવા સક્શન દ્વારા વધારો થયો હતો.આ બાઈન્ડિંગ ઘણું ઓછું હતું અથવા જ્યારે HEPES-KOH, અથવા Tris-acetate બફરનો ઉપયોગ તેના બદલે કરવામાં આવ્યો હતો.[3H]L-ગ્લુટામેટ માઇક્રોફ્યુજ ટ્યુબ સાથે બંધનકર્તા L- દ્વારા અટકાવવામાં આવ્યું હતું પરંતુ ગ્લુટામેટ અને એસ્પાર્ટેટના D-આઇસોમર્સ દ્વારા નહીં.DL-2-amino-7-phosphonoheptanoic acid પણ બંધનને અટકાવતું નથી.અન્ય સંયોજનો કે જેઓ નીચાથી મધ્યમ નિષેધ દર્શાવે છે: એન-મિથાઈલ-ડી-એસ્પાર્ટેટ, ક્વિસ્ક્યુલેટ, એલ-ગ્લુટામિક એસિડ ડાયથાઈલ એસ્ટર, એન-મિથાઈલ-એલ-એસ્પાર્ટેટ, કાઈનેટ અને 2-એમિનો-4-ફોસ્ફોનોબ્યુટાયરેટ.બંધનકર્તા ઉંદરના મગજના પટલ દ્વારા નિષેધ કરવામાં આવ્યો હતો.જ્યારે ટ્રિસ-એસીટેટ બફરમાં બાઇન્ડિંગ કરવામાં આવ્યું ત્યારે વારંવાર સ્થિર-પીગળેલી પટલની તૈયારી સાથે પ્રોટીન-આધારિત [3H]ગ્લુટામેટ બાઇન્ડિંગ મેળવવામાં આવ્યું હતું.ગ્લુટામેટ બિન ડીંગ એસેમાં ટ્રિસ-એસીટેટ અથવા HEPES-KOH બફરનો ઉપયોગ કરવાની ભલામણ કરવામાં આવે છે.જો ટ્રિસ-એચસીએલ અથવા ટ્રિસ-સાઇટ્રેટ બફરનો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે, તો માઇક્રોફ્યુજ ટ્યુબ અથવા ગ્લાસ ફાઇબર ફિલ્ટરને જોડવા માટે યોગ્ય નિયંત્રણ પ્રયોગ કરવો જોઈએ.