ઉત્પાદનો

એન્ઝાઈમેટિક પ્રવૃત્તિને બદલવા માટે એક સાથે પરિવર્તનની અસરો જે રીતે જોડાય છે તે સરળતાથી અનુમાનિત નથી કારણ કે આ અસરો હંમેશા રેખીય રીતે ઉમેરાતી નથી.આથી, સબસ્ટ્રેટને બાંધતા એમિનો એસિડ અવશેષોના એક સાથે પરિવર્તનની અસરોની લાક્ષણિકતા ઉત્સેચકોની સબસ્ટ્રેટ વિશિષ્ટતાને સમજવામાં નોંધપાત્ર યોગદાન આપી શકે છે.સ્પોડોપ્ટેરા ફ્રુગીપર્ડા (Sfbetagly) ના બીટા-ગ્લાયકોસિડેઝમાં, Q39 અને E451 બંને અવશેષો સબસ્ટ્રેટ સાથે ક્રિયાપ્રતિક્રિયા કરે છે અને સબસ્ટ્રેટ વિશિષ્ટતાને વ્યાખ્યાયિત કરવા માટે આ જરૂરી છે.Sfbetagly (A451E39, S451E39 અને S451N39) ના ડબલ મ્યુટન્ટ્સ સાઇટ-નિર્દેશિત મ્યુટાજેનેસિસ દ્વારા તૈયાર કરવામાં આવ્યા હતા, જે બેક્ટેરિયામાં વ્યક્ત કરવામાં આવ્યા હતા અને એફિનિટી ક્રોમેટોગ્રાફીનો ઉપયોગ કરીને શુદ્ધ કરવામાં આવ્યા હતા.આ ઉત્સેચકોને સબસ્ટ્રેટ તરીકે p-nitrophenyl beta-galactoside અને p-nitrophenyl beta-fucoside નો ઉપયોગ કરીને દર્શાવવામાં આવ્યા હતા.Q39 અને E451 સ્થાનો પર સાઇટ-નિર્દેશિત મ્યુટેશન ધરાવતા Sfbetagly ના સિંગલ અને ડબલ મ્યુટન્ટ્સ માટે k cat/Km રેશિયોનો ઉપયોગ એ દર્શાવવા માટે કરવામાં આવ્યો હતો કે ડબલ મ્યુટેશન (Gdouble) ની ESdouble ડેગર (એન્ઝાઇમ-ટ્રાન્ઝીશન સ્ટેટ કોમ્પ્લેક્સ) ની મુક્ત ઊર્જા પર અસર કરે છે. ડેગરક્સી) એ સિંગલ મ્યુટેશન (Gdouble daggerx અને Gdouble daggery) ના પરિણામે થતી અસરોનો સરવાળો નથી.Gdouble ડેગરમાં આ તફાવત સૂચવે છે કે એકલ પરિવર્તનની અસરો આંશિક રીતે ઓવરલેપ થાય છે.આથી, આ સામાન્ય અસર Gdouble daggerxy માં માત્ર એક જ વાર ગણાય છે.બીટા-ગ્લાયકોસિડેસિસ પરના ક્રિસ્ટલોગ્રાફિક ડેટા Q39 અને E451 અવશેષો અને સબસ્ટ્રેટના સમાન હાઇડ્રોક્સિલ જૂથને સંડોવતા બિડેન્ટેટ હાઇડ્રોજન બોન્ડની હાજરી દર્શાવે છે.તેથી, થર્મોડાયનેમિક અને ક્રિસ્ટલોગ્રાફિક ડેટા બંને સૂચવે છે કે અવશેષો Q39 અને E451 સબસ્ટ્રેટ સાથેની તેમની સંબંધિત ક્રિયાપ્રતિક્રિયાઓ પર પરસ્પર પ્રભાવ પાડે છે.