ઉત્પાદનો

પ્રોટીન ફોસ્ફોરાયલેશન વિવિધ સેલ્યુલર કાર્યોને નિયંત્રિત કરે છે અને છોડના પ્રારંભિક વિકાસમાં મુખ્ય ભૂમિકા ભજવે છે.અરેબિડોપ્સિસના રોપાઓમાં પ્રોટીન ફોસ્ફોરાયલેશનની અગાઉની તપાસને પૂરક બનાવવા અને વિસ્તૃત કરવા માટે અમે વૈકલ્પિક અભિગમનો ઉપયોગ કર્યો છે જે બિન-ડિનેચરિંગ સ્થિતિમાં પ્રોટીન નિષ્કર્ષણને સ્થિર મેટલ-આયન એફિનિટી ક્રોમેટોગ્રાફી (IMAC) સાથે રુબિસ્કોમાં અખંડ ફોસ્ફોપ્રોટીન્સના સંવર્ધનને જોડે છે. દ્વિ-પરિમાણીય જેલ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ (2-DE) અને લિક્વિડ ક્રોમેટોગ્રાફી-ટેન્ડમ માસ સ્પેક્ટ્રોમેટ્રી (LC-MS/MS) નો ઉપયોગ કરીને.ઇન-જેલ ટ્રિપ્સિન પાચન અને પસંદ કરેલા જેલ સ્પોટ્સના વિશ્લેષણમાં 144 ફોસ્ફોરીલેટેડ પેપ્ટાઇડ્સ અને અવશેષો ઓળખવામાં આવ્યા હતા, જેમાંથી માત્ર 18 ફોસ્ફોપેપ્ટાઇડ્સ અને 8 ફોસ્ફોસાઇટ્સ ફોસ્ફોટ 4.0 અને P3DB અરેબિડોપ્સિસ થલિયાના ફોસ્ફોસરી સાઇટમાં મળી આવ્યા હતા.82 ઓળખાયેલા ફોસ્ફોપ્રોટીનમાંથી અડધાથી વધુ કાર્બોહાઇડ્રેટ ચયાપચય, પ્રકાશસંશ્લેષણ/શ્વસન અથવા ઓક્સિડેટીવ તણાવ પ્રતિભાવ મિકેની એસએમએસમાં સામેલ હતા.2-DE અને LC-MS/MS પહેલાના અખંડ ફોસ્ફોપ્રોટીનનું સંવર્ધન પેપ્ટાઈડ-સ્તરના સંવર્ધનનો ઉપયોગ કરતી પદ્ધતિઓની તુલનામાં ફોસ્ફોરીલેટેડ થ્રેઓનિન અને ટાયરોસિન અવશેષોની શોધમાં વધારો કરે છે, જે સૂચવે છે કે બે અભિગમો કવરફોટો કવરેજ સાઇટની દ્રષ્ટિએ કંઈક અંશે પૂરક છે.પરિપક્વ અરેબિડોપ્સિસ પાંદડાઓ માટે અગાઉ મેળવેલા પરિણામો સાથે યુવાન રોપાઓના પરિણામોની સરખામણી કરવાથી પાંચ પ્રોટીન ઓળખવામાં આવે છે જે આ પેશીઓમાં વિભિન્ન રીતે ફોસ્ફોરીલેટેડ હોય છે, જે છોડના વિકાસ દરમિયાન પ્રોટીન ફોસ્ફોરીલેશનની ગતિશીલતાની તપાસ માટે આ તકનીકની સંભવિતતા દર્શાવે છે.